en ru map

+7 (495) 545 07 08

Центрифуги среднего объема

Для разделения фракций способом центрифугирования в лабораторных условиях наиболее оптимальным является использование центрифуг среднего объема. За одну загрузку в них можно обрабатывать до 300 мл образцов. Скорость вращения изменяется от 300 до 6000 об/мин. Для случаев, когда нужно получить более высокое значение относительного центробежного ускорения (ОЦУ) применяются модели со скоростью вращения от 1000 до 8000 об/мин.

На лабораторных центрифугах в исследованиях применяются две методики центрифугирования в градиенте плотности. Их используют, когда образец содержит близкие по размеру или плотности органеллы или макромолекулы. При зональном центрифугировании исследуемый материал аккуратно наносится на поверхность буферного раствора. В процессе центрифугирования частицы, проходя через буферный раствор, распределяются по объему в зависимости от размера и плотности. В качестве буферного раствора применяется коллоидный силикагель или раствор углеводов. У них концентрация увеличивается по мере приближения ко дну. За счет этого разделение материала происходит более качественно. Процесс центрифугирования прекращают прежде, чем частицы достигают дна. При этом разделенные фракции видно четче.

Другой методикой исследования является изопикническое центрифугирование. Исследуемый образец растворяется в растворе хлорида цезия. Этот раствор используется потому, что при центрифугировании изменяется его градиент плотности. Растворенные частицы распределяются в объеме пробирки в соответствии со своей плавучей плотностью. В отличие от зонального центрифугирования изопикнический процесс завершается наступлением равновесия и длится значительно дольше.

На скорость осаждения частиц влияет их коэффициент седиментации, который зависит от ряда характеристик. К ним относятся:

  • масса частицы;
  • форма (она определяет величину коэффициента трения);
  • парциальный удельный объем (определяется, как обратная величина плотности частицы).

Центрифуги среднего объема оснащаются сменными роторами разных конструкций. Для высоких скоростей применяются роторы со свободным подвешиванием пробирок, в остальных случаях используются угловые с разным количеством мест под пробирки. Чтобы унифицировать роторы, в комплекте с центрифугой поставляются переходные адаптеры под пробирки разного размера. На установке задается скорость вращения и время центрифугирования.